文久三年(1863年),新選組成立,当时局长为芹泽鸭。不久,以土方岁三、近藤勇等天然理心流剑士为中心的新選組骨干,以肃清组内败类为由,斩杀芹泽鸭,迫使新见锦切腹,并由近藤勇出任新選組局长,土方岁三出任副长。然后一番队队长为冲田总司、三番队队长为斋藤一。可以看出,新選組的中心力量都是天然理心流剑士。
元治元年(1864年)六月五日,长州藩维新志士在京都池田屋秘密集会。因为消息泄露,池田屋遭新選組袭击,除桂小五郎(即维新三杰之一的木户孝允)因故未到会外,大部分长州藩志士高层人物或被斩杀,或被捕。这就是震惊日本的“池田屋事件”。新選組一战成名。由于新選組本处地处京都壬生地区,因此被人们称为“壬生狼”。
庆应二年(1866年),在坂本龙马的努力下,历来相互仇视的萨摩藩跟长州藩同盟,维新力量日趋壮大。
庆应四年(1868)年,戊辰战争爆发。在维新军队的攻击下,幕府军节节溃败。四月,德川幕府末代将军德川庆喜将政权交还天皇。
戊辰战争后,新選組残部在土方岁三的带领下,向东北投奔会津藩,与其他佐幕军队一起,继续抵抗维新政府。但是,由于会津若松城战役的失败,新選組残部只得继续向北逃奔至北海道函馆。
明治二年(1869年),箱馆战争爆发。岁三独自骑马举刀突入敌阵,被步枪子弹贯穿胸部,战死。新選組正式结束。
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